液相色譜法只要求樣品能制成溶液,不受樣品揮發(fā)性的限制,流動相可選擇的范圍寬,固定相的種類繁多,因而可以分離熱不穩(wěn)定和非揮發(fā)性的、離解的和非離解的以及各種分子量范圍的物質。
高效液相色譜儀色譜柱不平衡。有時液相色譜儀色譜柱的平衡時間很長,特別是當流動相發(fā)生變化時,液相色譜儀色譜柱的平衡時間需要很長。在沒有平衡之前,高效液相色譜的基線肯定是不穩(wěn)定的。溶液:用中等極性溶劑沖洗。當改變流動相時,在分析前用10~20倍床體積的新流量沖洗液相色譜儀的色譜柱。
液相色譜經常發(fā)生基線不穩(wěn)。主要原因和解決方法如下:
1.高壓泵止回閥堵塞導致基線波動;解決方法:拆除單向閥,用超聲波在純水中浸泡20分鐘以上,清除堵塞。
2.流動相溶解氣體引起的基線波動。解決方案:超聲波脫氣15-30分鐘或充氮一般可以解決。
3.高壓泵墊片損壞,造成液相色譜儀壓力波動和基線不穩(wěn)定。解決方法:更換高壓泵的密封墊。
4.高壓泵或液相色譜儀的色譜柱設有泄漏點,解決辦法是查找和確定泄漏的位置。
5.液相色譜儀的色譜柱因各種原因產生氣泡。解決方法:在檢測器的水池出口加負壓調節(jié)器。
6.液相色譜儀檢測器波長設置不當,基線不穩(wěn)定,因為沒有設置在最大吸收波長。解決方案:將探測器的測試波長調整到最大吸收波長。